重组腺相关病毒载体表达抗表皮生长因子受体抗体对胰腺癌细胞株抑制作用的研究

Inhibition effect of anti epidermal growth factor receptor antibody mediated by recombinant adeno associated virus vector on pancreatic cancer cell lines

  • 摘要: 目的 构建能在体内长期表达抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体的重组腺相关病毒(rAAV) 载体,观察其对人胰腺癌细胞株的抑制作用。方法 将抗人EGFR单链抗体可变区(SCFV)基因插入腺相 关病毒载体的KpnⅠ和BglⅡ位点,构建成含抗EGFR单链抗体基因的重组腺相关病毒载体(rAAVanti EGFR)。设立对照组(rAAV1EGFP组)和实验组(rAAV1antiEGFR组),观察抗EGFR单链抗体蛋白的表 达情况。采用Westernblot检测抗体蛋白的表达、CCK8法和流式细胞仪检测6种人胰腺癌细胞株(PCT3、 SW1990、Capan1、ASPC1、MiaPaCa2及PANC1细胞)的抑制率和凋亡率。两组比较采用t检验。结果 抗EGFR单链抗体蛋白能在6种人胰腺癌细胞株中表达,对照组和实验组胰腺癌ASPC1细胞抑制率分别 为1.1% ±2.4%和15.1% ±3.5%,两组比较,差异有统计学意义(t=6.598,P<0.05)。对照组和实验组 PANC1细胞凋亡率分别为7.0% ±3.0%和11.4% ±2.5%,两组比较,差异无统计学意义(t=1.952,P> 0.05);对照组和实验组SW1990、ASPC1、Capan1、PCT3、MiaPaCa2细胞凋亡率分别为1.1%±0.8%、 1.5%±0.7%、1.7%±1.2%、1.1%±0.7%、2.2%±1.1%和17.6%±2.2%、46.9%±3.9%、20.0%± 2.8%、12.1%±1.6%、31.1%±2.5%,两组比较,差异均有统计学意义(t=12.208,19.846,10.405,10.909, 18.327,P<0.05)。结论 成功构建了携带抗EGFR单链抗体基因的rAAV载体,其表达的抗EGFR单链 抗体蛋白对人胰腺癌细胞株有明显的抑制作用。

     

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