基因芯片筛选人肝癌细胞株MHCC97中血管生成拟态相关基因

Searching for vasculogenic mimicry associated differentially expressed genes in human hepatocellular carcinoma cell line MHCC97 using functional grouping cDNA microarray

  • 摘要: 目的 通过观察三维培养条件下高、低转移人肝癌细胞株MHCC97H、MHCC97L形成血 管生成拟态(VM)的差异,探讨VM形成与细胞外基质和粘连分子相关机制。方法 建立MHCC97H、 MHCC97L三维培养体系,倒置显微镜下观察血管样结构形成差异。以人脐静脉内皮细胞、无转移人肝癌 细胞株Hep3B及正常人肝细胞株HL7702作对照。应用细胞外基质和粘连分子基因芯片筛选MHCC97H 和MHCC97L中差异表达的基因,并采用RTPCR和Westernblot验证芯片的结果。组间比较采用两样本 t检验。结果 三维培养24h,MHCC97H形成的血管样结构长度为(474±16)mm/cm2,MHCC97L为(320± 41)mm/cm2,两者比较,差异有统计学意义(t=6.119,P<0.05)。Hep3B及HL7702均不形成血管样结 构。在113个细胞外基质和粘连分子相关基因中,MHCC97H表达较MHCC97L上调的有7个,下调的有 3个。选取差异性表达的腱糖蛋白C和细胞外基质蛋白1经RTPCR及Westernblot验证,结果与基因芯 片结果基本一致。结论 高转移人肝癌细胞株MHCC97H体外形成VM能力明显较低转移人肝癌细胞株 MHCC97L强,其原因可能与MHCC97H差异表达某些细胞外基质和粘连分子相关基因有关。

     

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