摘要: 目的构建RhoA-siRNA表达载体，研究其对肝癌HepG2细胞肿瘤生物学行为的影响。方法利用pGenesil一1质粒构建RhoA—siRNA表达载体，以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞中建立稳定细胞系，并分为3组。转染pGenesil一1一RhoA-siRNA载体者为HepG2／RhoA—siRNA组，转染随机对照载体者为HepG2／control组，未转染的肝癌HepG2细胞作为HepG2组。Western blot检测RhoA-siRNA对其蛋白表达的抑制情况。分别采用M1Tr法、细胞划痕损伤和平板克隆形成实验检测转染细胞的增殖、迁移和生长潜能，流式细胞仪检测细胞周期变化。采用单因素方差分析、x2检验比较各组差异。结果3组细胞蛋白表达水平比较，HepG2／RhoA-siRNA组RhoA蛋白的表达明显下调(F=178．19，P<0．05)。HepG2／control组和HepG2组细胞划痕损伤在48 h内愈合，而HepG2／RhoA-siRNA组则不能愈合。HepG2／RhoA—siRNA组克隆形成率低于HepG2组和HepG2／control组，分别为39％±3％、67％±5％、70％4-6％，其差异有统计学意义(x2=33．34，38．69，P<0．05)。RhoA基因沉默显著抑制肝癌HepG2细胞的增殖，细胞周期中Go／Gl期细胞数蕾增多而s期细胞数量减少(F=70．46，76．57，P<0．05)。结论RhoA·siRNA表达载体能抑制肝癌HepG2细胞的增殖和迁移，可为肝癌的基因治疗提供新的方法。