摘要: 目的探讨冷保存后体外培养的sD大鼠肝内不同节段胆管跨膜型黏蛋白Mucl、Muc3A、Muc4的表达情况。方法用酶消化辅助机械分离方法获得sD大鼠肝内胆管组织，以非吻合口狭窄好发部位为界分为大、小胆管。胆管片段在鼠尾胶原内培养48 h后进行实验。实验分为对照组、冷保存1 h组、冷保存12 h组。采用RT—PCR和Western blot法检测黏蛋白Mucl、Muc3A、Mue4的表达情况。3组比较采用方差分析，两丽比较采用LSD法检验。结果大、小胆管均表达黏蛋白Mucl、Muc3A、Muc4。随着冷保存时间延长，大胆管MucI、Muc3A、Mue4 mRNA显著降低，冷保存1 h组分别为0．95 s0．14、0．26±0．04、0．24±0．06，冷保存12 h组分别为0．18±0．03、0．14±0．04、0．22±0．07，对照组分别为1．00±0．20、1．00±0．09、1．00±0．21，3组比较差异有统计学意义(F=8．8，57．1，10．8，P<0．05)。冷保存12 h组MucI和Muc3A mRNA显著低于冷保存1 h组(P<0．05)。大胆管Mucl、Mu04蛋白表达水平亦随冷保存时间延长而降低，对照组分别为1．05±0．41、1．06±0．38，冷保存1 h组分别为0．82±0．13、0．73士0．10，冷保存12 h组分别为0．56±0．1l、0．33士0．04，3组比较差异有统计学意义(F=3．9，12．6，P<0．05)。冷保存12 h组Muci蛋白显著低于对照组(P<0．05)。冷保存12 h组Mue4蛋白显著低于冷保存l h组(P<0．05)。而小胆管Muc3A mRNA呈升高趋势，对照组为0．06±0．03，冷保存1 h组为0．15±0．04，冷保存12 h组为0．19±O．05，与大胆管不同。结论长时间冷保存后肝内非吻合口狭窄好发部位胆管黏蛋白Mucl、Muc3A、Mue4表达显著降低，减弱了其对胆管上皮细胞的保护作用，可加重胆管损伤。