摘要: 目的探讨环氧合酶2(COX一2)3’-uTR各调控元件在结肠癌细胞株HT29中的调控作用。方法以HT29细胞的总RNA为模板，采用RT—PeR法扩增COX一2 3 7一UTR全长2217 bp，上下游引物5’端接xba I酶切位点。通过PCR制备3’端缺失体方法结合荧光素酶报告基因技术构建含COX-2 3'-UTR不同区域长度的报告质粒(包括3’UTR的全长、前端156 bp区域、前端347 bp区域、前端1006 bp区域、156～347 bp区域，157～2217 bp区域)。用瞬时转染的方法将含COX-2 3’一uTR不同区域长度的报告质粒和内参pRL-SV40质粒共转染结肠癌细胞株HT29 24 h，然后分别测定荧光素酶相对活性。数据分析采用t检验。结果3’-UTR的全长、前端156 bp区域、前端347 bp区域、156—347 bp区域分别可将荧光素酶活性下调70．4％、37．4％、64．8％、24．2％(t=6．13，7．73，9．75，3．92，P<0．05)。前端1006 bp区域、157—2217 bp区域对荧光素酶活性无明显影响(t=0．13，0．01，P>0．05)。结论在COX．2 3’-uTR 156—347 bp区域有一重要i咭：I控元件可与ARE元件共同作用下调目的基因表达。结肠癌细胞株HT29中COX-2 3’-UTR中含多个调节元件，通过协调作用控制基冈表达。