ICOS基因转染对CIK细胞杀伤胆管癌细胞作用的研究

Effects of inducible co stimulator gene on the cytotoxic activity of cytokine induced killer cells against cholangiocarcinoma cells

  • 摘要: 目的 探讨转染可诱导共刺激分子(induciblecostimulator,ICOS)基因对细胞因子诱导杀伤(cytokineinducedkiller,CIK)细胞杀伤胆管癌细胞的作用。方法 构建含ICOS基因的腺病毒载体并转染给CIK细胞(CIKICOS细胞组),单纯CIK及CIKEGFP细胞为对照组,观察3组CIK细胞体外增殖与凋亡情况以及对胆管癌细胞的杀伤作用;ELISA法检测3组CIK细胞上清液中IFNγ、IL2及TNFα的表达。建立胆管癌移植瘤的SCID小鼠模型,按随机数字表法将40只SCID小鼠分为生理盐水对照组、CIK、CIKEGFP、CIKICOS细胞治疗组,观察转染ICOS基因的CIK细胞对小鼠胆管癌细胞的杀伤作用。结果 CIKICOS细胞组体外增殖明显强于CIK及CIKEGFP细胞组;培养第20天CIKICOS与CIK细胞凋亡率分别为069%和290%,第23天分别为089%和492%;在不同效靶比CIKICOS细胞组杀伤效应均显著高于CIK与CIKEGFP细胞组(F=13.37,6.46,25.51,P<0.05);CIKICOS细胞组上清液中IFNγ的浓度为(4950±473)μg/L,显著高于CIK细胞组(3053±373)μg/L及CIKEGFP细胞组(3012±264)μg/L(F=38.89,P<0.05)。CIKICOS细胞治疗组小鼠肿瘤生长速度明显低于CIK与CIKEGFP细胞治疗组,肿瘤坏死面积明显大于CIK与CIKEGFP细胞治疗组,瘤内CIK细胞数量最多。结论 CIK细胞在体内外均具有杀伤胆管癌细胞的作用。转染ICOS基因后,CIK细胞体外存活时间延长、增殖能力增强、IFNγ的表达增多,其在体内外抗胆管癌作用明显增强。

     

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