人高迁移率族蛋白突变体抗炎效应的初步研究
Preliminary study on anti inflammatory effect of human HMGB1 protein mutants
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摘要: 目的 构建6个高迁移率族蛋白1(highmobilitygroup1protein,HMGB1)突变体,从中筛选出与靶细胞膜上受体结合但没有致炎效应的突变体蛋白,并检测其在体外竞争性抑制HMGB1致炎效应的作用。方法 在已成功制备HMGB1及其6个重组HMGB1突变体蛋白的基础上,对目的蛋白进行了有效纯化。采用细胞免疫荧光标记、激光共聚焦显微镜筛选出能与THP1细胞膜上受体结合的突变体。再通过ELISA筛选出没有致炎效应的突变体。进一步筛选出能在体外竞争性抑制HMGB1致炎效应的突变体。结果 筛选出的HMGB1M1、M2、M3、M5能在体外竞争性抑制HMGB1的致炎效应,其中M1、M2竞争性抑制作用最强。结论 成功筛选出在体外竞争性抑制HMGB1致炎效应的重组突变体,为抗炎治疗提供新型候选制剂。