腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal间质细胞及其表达

Adenovirus vector mediating SCL gene expression and transfecting Cajal interstitial cells and expression of adenovirus vector

  • 摘要: 目的 构建含有人干细胞白血病(stemcellleukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对Cajal间质细胞的转染及其介导的SCL基因的表达。为下一步在体转染Cajal间质细胞,观察其对Cajal间质细胞表型逆转的影响奠定基础。方法 利用AdEasy系统、细菌内同源重组法快速构建重组腺病毒AdGFP/SCL。通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对培养的Cajal间质细胞的转染效率。通过RTPCR法分析转染Cajal间质细胞后SCLmRNA的表达。结果 酶切鉴定及PCR结果证明成功构建了含有人SCL基因的重组腺病毒,病毒滴度为1.6×1011pfu/ml;对Cajal间质细胞的转染率高达100%;RTPCR法检测转染Cajal间质细胞后SCLmRNA有表达。结论 成功构建的含人SCL基因的重组腺病毒对Cajal间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal间质细胞中表达。

     

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