荧光标记数字化蛋白截短检测技术在结直肠APC基因截短型突变检测中的应用

Detection of truncating mutations of APC gene by digital protein truncation test labeled with fluorescent Lys t RNA

摘要: 目的探讨APC基因截短型突变与散发性结直肠癌的关系和荧光标记数字化蛋白截短检测技术(PTT)在APC基因截短型突变检测中的应用。方法收集2008年9月至2010年9月宁夏医科大学总医院96例散发性结直肠癌(结肠癌44例、直肠癌52例)患者手术切除标本。应用荧光标记数字化PTT，以从基因组DNA聚合酶链式反应扩增片段为体外翻译的模板，对50例结直肠癌患者APC基因突变聚集区进行筛查，根据有无截短蛋白的出现，判断基因突变是否发生。采用DNA直接测序法，对46例结直肠癌患者APC基因突变聚集区进行突变检测。对两种方法的突变检出率比较采用χ2检验。结果 50例采用荧光标记数字化PPT检测的结直肠癌标本中，13例发生截短型突变，突变检出率为26%(13/50)，对其中4例阳性DNA样本进行测序，为无义突变，均导致截短蛋白的产生。46例采用DNA直接测序法检测的结直肠癌标本中，11例发生截短型突变，突变检出率为24%(11/46)，与荧光标记数字化PPT突变检出率比较，差异无统计学意义(χ2=0.033，P>0.05)。结论 APC基因截短型突变是我国散发性结直肠癌较常见的基因改变事件。荧光标记数字化PTT是快速、高效的基因突变筛查技术。